डीएनए संश्लेषण का मूल सिद्धांत

रासायनिक डीएनए संश्लेषण ठोस-चरण संश्लेषण रणनीति और फॉस्फोरामिडाइट रसायन विज्ञान पर आधारित है।जैविक डीएनए संश्लेषण से भिन्न, रासायनिक डीएनए संश्लेषण में सामग्री डीएमटी (4, 4-डाइमेथोक्सीट्रिटिल) और फॉस्फोरामिडाइट संशोधित डीऑक्सीराइबॉक्साइड है, जैसा चित्र 1 में दिखाया गया है। डीएनए संश्लेषण ठोस समर्थन पर किया जाता है (हम विभिन्न की पेशकश कर सकते हैं)ओलिगो सिंथेसिस कॉलम), यानी सीपीजी (नियंत्रित छिद्र ग्लास) और पीएस (पॉलीस्टाइनिन), और संपूर्ण संश्लेषण एक पर किया जाता हैडीएनए/आरएनए सिंथेसाइज़र, जो हमारा मुख्य उपकरण है, के अलग-अलग मॉडल हैं जैसे: HY सिंगल चैनल सिंथेसाइज़र, HY-12, HY-192 और आदि, संश्लेषण दिशा 3' से 5' तक है, और एक न्यूक्लियोटाइड को एक के माध्यम से ठोस समर्थन में पेश किया जाता है संश्लेषण चक्र.आमतौर पर संश्लेषण चक्र में चार चरण होते हैं, डिप्रोटेक्शन, कपलिंग, कैपिंग और ऑक्सीडेशन (चित्रा 2)।डिप्रोटेक्शन को ठोस समर्थन पर डीएमटी समूह या पिछले न्यूक्लियोसाइड पर 5' हाइड्रॉक्सिल समूह को हटाने के लिए सेट किया गया है, डाइक्लोरोमेथेन में 3% ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड का उपयोग डिप्रोटेक्शन अभिकर्मक के रूप में किया जाता है।फिर फ़ॉस्फ़ोरमिडाइट संशोधित डीऑक्सीराइबोक्सीसाइड को एक्टिवेटर, यानी 5-एथिलथियोटेट्राज़ोल या 4, 5-डिसायनोइमिडाज़ोल की सहायता से हाइड्रॉक्सिल समूह को एक्सपोज़ करने की अनुमति दी गई, जिससे फ़ॉस्फाइटेट्रिस्टर (III) का निर्माण हुआ, और युग्मन चरण का एहसास हुआ।अवांछित दोष अनुक्रमों के गठन को कम करने के लिए, युग्मन चरण के दौरान अप्रतिक्रियाशील हाइड्रॉक्सिल समूह को अवरुद्ध करने के लिए एक कैपिंग चरण किया जाता है।अंत में, अस्थिर फ़ॉस्फाइटट्राइस्टर (III) को पाइरीडीन की उपस्थिति में ऑक्सीडेंट के रूप में आयोडीन के साथ रासायनिक स्थिर फ़ॉस्फ़ोरट्राइस्टर (V) में ऑक्सीकृत किया जाता है।

संश्लेषित डीएनए को अमीनोलिसिस द्वारा ठोस समर्थन से विखंडित किया जा सकता है, फॉस्फोरट्रिस्टर पर 2-सायनोइथाइल संरक्षित समूह और न्यूक्लियोबेस पर एमाइड को एक ही समय में विखंडित किया जाता है, रैक में संश्लेषण प्लेटें और संश्लेषण कॉलम सीधे प्रतिक्रिया कक्ष में रखे जाते हैं कीडिप्रोटेक्शन उपकरण.मांग पर एचपीएलसी, वैद्युतकणसंचलन और ओपीसी द्वारा क्रूड डीएनए तैयार किया जा सकता है, हम आपको यह भी प्रदान कर सकते हैंशुद्धिकरण उपकरणपोस्ट-प्रोसेसिंग के लिए.