डीएनए संश्लेषण दक्षता निर्धारित करने वाले कारक

विशिष्ट डीएनए, आरएनए और गैर-प्राकृतिक न्यूक्लिक एसिड के संश्लेषण में, डीप्रोटेक्शन और युग्मन चरण महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।

डिप्रोटेक्शन चरण ठोस समर्थन पर डीएमटी समूह या कार्बनिक एसिड के साथ पिछले न्यूक्लियोसाइड पर 5' हाइड्रॉक्सिल समूह को हटाना है, और निम्नलिखित युग्मन चरण के लिए हाइड्रॉक्सिल समूह को उजागर करना है।डाइक्लोरोमेथेन या टोल्यूनि में 3% ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड का उपयोग ज्यादातर डिप्रोटेक्शन चरण को पूरा करने के लिए किया जाता है।ट्राइक्लोरोएसिटिक एसिड की सांद्रता और डिप्रोटेक्शन समय (डीब्लॉकिंग समय) अंतिम उत्पादों की शुद्धता पर हावी है।कम सांद्रता और अपर्याप्त डीब्लॉकिंग समय डीएमटी समूह को प्रतिक्रियाहीन बना देता है, जिससे उपज कम हो जाती है और अवांछित अशुद्धियाँ बढ़ जाती हैं।डीब्लॉकिंग का लंबा समय संश्लेषित अनुक्रमों के डिप्यूरिन की ओर ले जा सकता है, जिससे अप्रत्याशित अशुद्धियाँ बन सकती हैं।

युग्मन चरण सॉल्वैंट्स की जल सामग्री और हवा में नमी के प्रति संवेदनशील है।संश्लेषण में पानी की सांद्रता 40 पीपीएम से कम, 25 पीपीएम से कम बेहतर होनी चाहिए।निर्जल संश्लेषण स्थिति को बनाए रखने के लिए, न्यूक्लिक एसिड का संश्लेषण कम आर्द्रता वाले वातावरण में किया जाना चाहिए, इसलिए हम अपने ग्राहक को इसका उपयोग करने की सलाह देते हैंएमिडाइट्स विघटित उपकरण, जो हवा के संपर्क से बचने के लिए पाउडर या तैलीय फॉस्फोरामिडाइट को निर्जल एसीटोनिट्राइल में घोल सकता है।

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डीएनए संश्लेषण दक्षता4 निर्धारित करने वाले कारक

चूंकि फॉस्फोरामिडाइट्स का विघटन गैर-पानी की स्थिति में बेहतर होता है, और अभिकर्मकों और एमिडाइट में ट्रेस पानी को सोखने के लिए आणविक जाल तैयार करने की आवश्यकता होती हैआणविक जाल.हम 50-250 मिलीलीटर अभिकर्मक बोतलों के लिए 2 ग्राम, 250-500 मिलीलीटर अभिकर्मक बोतलों के लिए 5 ग्राम, 500-1000 मिलीलीटर अभिकर्मक बोतलों के लिए 10 ग्राम, और 1000-2000 मिलीलीटर अभिकर्मक बोतलों के लिए 20 ग्राम की अनुशंसा करते हैं।

फॉस्फोरामिडाइट्स का विघटन निष्क्रिय वातावरण के तहत किया जाना चाहिए, और एक्टिवेटर अभिकर्मकों और एसीटोनिट्राइल का प्रतिस्थापन समय पर समाप्त होना चाहिए।कैपिंग और ऑक्सीकरण अभिकर्मकों का उपयोग जितनी जल्दी हो सके किया जाना चाहिए, खुले अभिकर्मक कम शेल्फ जीवन देते हैं, और संश्लेषण के दौरान कम गतिविधि देते हैं।


पोस्ट करने का समय: अगस्त-09-2022